Perbedaan antara RT-PCR dan QPCR

Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR)

RT-PCR vs. QPCR

Kemajuan dalam bioteknologi telah menghasilkan penemuan beberapa cara untuk mengatasi tuntutan transplantasi organ selama bertahun -tahun. Sebelumnya, seseorang yang secara sukarela menyumbangkan organ apa pun segera setelah kematian kepada seorang pasien yang membutuhkan hanya bisa memulai operasi untuk transplantasi. Studi dan penelitian secara terus -menerus ahli biologi mengarah pada penemuan sel induk.

Sel induk mengacu pada yang diambil dari DNA embrio, yang akan berfungsi sebagai sumber untuk regenerasi sel yang pada dasarnya akan menjadi klon organ di mana DNA telah diambil. Sementara aktivis hak asasi manusia melobi untuk menghentikan prosedur semacam itu, operasi yang berhasil memang telah membuktikan efektivitas perkembangan sel induk dalam transplantasi organ.

Namun, sebelum seseorang dapat menghargai dan sepenuhnya memahami sel induk, ada kebutuhan untuk dibiasakan dengan berbagai terminologi yang terkait dengan penemuan ilmiah ini. Budidaya sel induk berkaitan dengan DNA dan pengkodeannya. Dengan demikian, sangat penting bagi siswa atau individu yang tertarik di lapangan untuk membedakan antara RT-PCR dan qPCR.

Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) adalah salah satu dari banyak varian reaksi berantai polimerase, atau PCR. Teknik laboratorium ini banyak digunakan dalam biologi molekuler agar para ilmuwan menghasilkan banyak salinan dari urutan DNA tertentu melalui proses yang diciptakan sebagai “amplifikasi.Perbedaan antara RT-PCR dan PCR tradisional adalah bahwa RNA pertama kali ditranskripsi secara terbalik ke dalam pelengkap DNA-nya, yang memanfaatkan transkriptase terbalik. DNA komplementer baru yang mengandung transkripsi terbalik kemudian akan diperkuat menggunakan PCR tradisional atau PCR real-time.

Sebagian besar siswa yang mempelajari proses ini sering membuat kesalahan dengan pertukaran transkripsi terbalik PCR dan PCR real-time karena keduanya disingkat sama. Untuk menghindari kebingungan, ahli biologi menyebut PCR real-time sebagai PCR real-time kuantitatif atau qPCR.

QPCR sangat berbeda dari RT-PCR, karena qPCR bertanggung jawab untuk mengukur amplifikasi saat terjadi. Dapat dikatakan bahwa RT-PCR memulai proses amplifikasi, sedangkan qPCR mengukurnya sebagai prosedur terjadi.

PCR real-time kuantitatif

QPCR sebenarnya telah merevolusi metode pendekatan satu arah tradisional ketika datang untuk mengukur DNA dan RNA, karena menerapkan metode qPCR memungkinkan ahli biologi untuk menentukan konsentrasi awal asam inti bahkan sebelum hasil reaksi telah diamati dan mencatat.

Penerapan qPCR, yang sekarang dianggap sebagai teknik analisis yang paling kuat dan sensitif untuk studi genetik, telah melebar secara signifikan. Saat ini terlibat dalam analisis ekspresi gen kuantitatif, genotipe, deteksi patogen, dan analisis SNP, bersama dengan pengukuran interferensi RNA.

QPCR sering dikombinasikan dengan proses transkripsi terbalik untuk mengukur RNA messenger dan microRNA yang ada dalam sel jaringan yang diamati dan dieksperimen dengan. Ini kemudian memberikan perbedaan yang terlihat lain antara keduanya: RT-PCR dapat digunakan untuk proses amplifikasi, tetapi perlu digabungkan dengan qPCR untuk tujuan kuantifikasi.

QPCR juga dikenal lebih kuantitatif karena data dapat dikumpulkan sebagai fase pertumbuhan eksponensial (log) dari PCR berkembang. Ahli biologi mencatat bahwa jumlah produk sampingan PCR berbanding lurus dengan jumlah asam nukleat templat yang akan diukur melalui qPCR.

Di sisi lain, RT-PCR jauh dari memiliki sifat kuantitatif karena ketaatan terhadap intensitas pita yang diamplifikasi pada gel mengikuti standar konsentrasi dapat menyebabkan inferensi "semi-kuantitatif" yang ".

Ringkasan:

1.QPCR dan RT-PCR adalah istilah yang digunakan dalam bioteknologi dan digunakan untuk produksi beberapa salinan DNA.
2.RT-PCR digunakan untuk memperkuat transkripsi kode DNA terbalik; QPCR mengukur amplifikasi.
3.RT-PCR adalah untuk amplifikasi, sedangkan qPCR adalah untuk kuantifikasi.
4.QPCR bersifat kuantitatif, sedangkan RT-PCR tidak.